النشاط الثاني : تقنيات الهندسة الوراثية (عزل ونقل مورثة إلى البكتيريا )

يتطلب نقل مورثة إلى بكتيريا معينة، مجموعة من الوسائل و التقنيات ، و التي تمكن من عزل و قطع و دمج المورثة المرغوبة في الحمولة الوراثية للبكتيريات عبر مجموعة من المراحل.

أول مرحلة تتمثل في عزل المورثة المراد استعمالها، حيت يُعتمد على عدة طرق.

بعد تحديد الصفة المرغوبة، يتم عزل المورثة التي ترمز لها، و ذلك بطريقتين:

الطريقة الأولى:

بعد عزل ADN الخلية التي تحتوي على المورثة المراد نقلها، يتم قطع جزيئة ADN بواسطة أنزيمات الفصل Enzymes de restriction.

أنزيمات الفصل:  أنزيمات نوعية قادرة على التعرف في مستوى جزيئة ADN  على تسلسلات دقيقة من القواعد الازوتية، و قطع الجزئة على مستواها.

الطريقة الثانية:

 استخلاص ARNm  من الخلية التي تحتوي على المورثة المراد نقلها، و بواسطة أنزيم الناسخ العكسي يتم تركيب ADNc (Complémentaire) الذي يكون حاملا للمورثة المرغوبة، ثم تضاف لـ ADNc  أطراف موحدة.

الناسخ العكسي Transcriptase inverse : أنزيم مستخلص من الحمات، قادر على تركيب جز يئة ADN  انطلاقا من جزيئة ARNm .

 

تستعمل في الهندسة الوراثية مجموعة من النواقل Vecteurs تمكن من نقل المورثة المطلوبة إلى الخلية العائلة, كمدفع الجزيئات, الحقن المجهري, أو بواسطة البلاسميدات.

يستعمل الفيروس كناقل  لدمج مورثات سليمة داخل جينوم الانسان في حالة بعض الأمراض الوراثية.

 

مراحل استعمال البلاسميد كناقل:

استخراج البلاسميدات من البكتيرية.

فتح البلاسميد بواسطة أنزيم فصل يتم اختياره بناء على الأسس التالية:

  • يستعمل نفس أنزيم الفصل الذي تم اللجوء إليه لعزل المورثة المطلوبة لفتح البلاسميد لكي تتشكل الأطراف الموحدة
  • يجب على البلاسميد أن يتوفر على موقع واحد للقطع.

دمج ثم ربط المورثة المطلوبة بـ ADN البلاسميد بواسطة أنزيم الربط  Ligase. فنحصل على بلاسميد مغير وراثيا.

أستاذ مادة علوم الحياة و الأرض, درس بجامعة الحسن الثاني المحمدية, حاصل على: - الاجازة في البيولوجيا و الصحة - الإجازة المهنية في تدريس علوم الحياة و الأرض. - شهادة التأهيل التربوي للتعليم الثانوي التأهيلي. - ديبلوم الدراسات البيداغوجية و الديداكتيك العام و الخاص بمادة علوم الحياة و الأرض. - ديبلوم تقني متخصص في الاعلاميات العامة و البرامج المكتبية.